• Китайские биоинженеры разработали молекулярный инструмент smACGmax для замены трех типов нуклеотидов в ДНК.
• Технология smACGmax используется для направленной эволюции генов и создания клеток с новыми полезными свойствами.
• Метод smACGmax основан на системе молекулярных ножниц CRISPR/Cas9 и белке Cas9n, который не режет обе цепи ДНК.
• В систему smACGmax добавлены ферменты для порчи и удаления оснований, а также измененная версия человеческой гликозилазы для удаления гуанина.
• Система работает путем создания пустоты на одной цепи ДНК и надрезания второй цепи, что предотвращает работу системы ремонта оснований (BER).
• Транслезионные полимеразы клетки вставляют случайные основания на место удаленных оснований.
• Система протестирована на клетках человека (HEK293T и HeLa) и успешно изменила ген HBEGF, кодирующий рецептор для дифтерийного токсина.
• Эффективность замены гуанина ниже, чем других оснований, из-за необходимости наличия определенной последовательности нуклеотидов (мотива NGR) рядом с гуанином.